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    Nunzio DEL GAUDIO

    Insegnamento di AFP PATOLOGIA GENERALE

    Corso di laurea magistrale a ciclo unico in MEDICINA E CHIRURGIA (Sede di Caserta)

    Italiano

    Lingua di insegnamento

    ITALIANO

    Contenuti

    Dalla ricerca scientifica alla pubblicazione dei dati. Tumori e loro caratteristiche principali. Alterazioni sistemiche provocate dalla presenza dei tumori. Tecniche di laboratorio (WST, BrdU incorporation, wound scratch e transwell assay,lisato proteico, corsa elettroforetica, immunoblot, immunofluorescenza, IP, CoIP, ChIP e molte altre) che permettono di "misurare" le proprietà dei tumori (proliferazione, migrazione e invasività) e di comprendere le vie di trasduzione alterate nei tumori.
    Diagnostica di Laboratorio in Immunopatologia: diagnostica delle malattie autoimmuni sistemiche e organospecifica, delle auto infiammatorie, delle ipersensibilità e Allergie, delle immunodeficienze primarie o secondarie, delle Gammapatie monoclonali e dei tumori del sistema immunitario.

    Testi di riferimento

    Articoli di ricerca scientifica forniti di volta in volta, specifici per gli argomenti trattati.

    Obiettivi formativi

    L'insegnamento ha come obiettivo principale quello di ampliare le conoscenze degli studenti su quella che è la parte pratica della patologia generale e in immunopatologia. In particolare si pone grande attenzione su come dai risultati sperimentali ottenuti in un laboratorio di ricerca vengano ricavate le nozioni che poi vengono pubblicate su articoli scientifici e libri di testo.

    Prerequisiti

    Conoscenza della Patologia generale, in particolare dei tumori e delle alterazioni ad essi legate.
    Conoscenza della Immunobiologia e Immunopatologia.

    Metodologie didattiche

    I concetti principali saranno esposti con l’ausilio di slides in PowerPoint, cui seguiranno esercitazioni pratiche in laboratorio organizzate in sessioni.

    Metodi di valutazione

    Quesiti e prova pratica in laboratorio.

    Altre informazioni

    Nessuna.

    Programma del corso

    Colture cellulari, metodi e supporti per il mantenimento delle cellule in coltura. Studio dei meccanismi di crescita e metastatizzazione dei tumori. Tecniche di analisi di proliferazione, migrazione ed invasività delle cellule tumorali. Conta cellulare. Tecniche di dosaggio dell'attività delle metalloproteasi. Analisi di espressione proteica, di attivazione di chinasi, di associazione tra proteine e di localizzazione proteica subcellulare tramite estrazione di proteine, separazione con SDS-page, co-immunoprecipitazione, tecniche di immunoblot e immunofluorescenza.
    Analisi dei fenotipi cellulari immunitarie mediante Citofluorometria a flusso continuo. Microscopia a Immunofluorescenza indiretta su cellule di linea Hep-2 o su tessuti da Fegato, Rene, Stomaco ecc. . Tecniche di immunofissazione della elettroforesi o isofocusing su strato dottile di agarosio delle proteine o Immunoglobline sieriche e dei fluidi biologici.

    English

    Teaching language

    Italian

    Contents

    From scientific research to data publication. Tumors and their main characteristics. Systemic alterations of tumors. Laboratory techniques (WST, BrdU incorporation, wound scratch and transwell assay, protein lysate, electrophoretic run, immunoblot, immunofluorescence, IP, CoIP, ChIP and many others) that allow to "measure" the properties of tumors (proliferation, migration and invasiveness) and to understand the altered transduction pathways in tumors.
    Laboratory Diagnostics in Immunopathology: diagnosis of systemic and organ-specific autoimmune diseases, auto-inflammatory diseases, hypersensitivity and allergies, primary or secondary immunodeficiencies, monoclonal gammopathies and tumors of the immune system.

    Textbook and course materials

    Scientific research articles provided from time to time, specific to the topics covered.

    Course objectives

    The main objective of the course is to broaden the students' knowledge on the practical part of general pathology and immunopathology. In particular, great attention is paid to how the experimental results obtained in a research laboratory are used to derive the notions that are then published in scientific articles and textbooks.

    Prerequisites

    Knowledge of general pathology, in particular of tumors and related alterations. Knowledge of immunobiology and immunopathology.

    Teaching methods

    The main concepts will be presented with the help of PowerPoint slides, followed by practical laboratory exercises organized in sessions.

    Evaluation methods

    Questions and practical test in the laboratory.

    Other information

    none.

    Course Syllabus

    Cell cultures, methods and media for maintaining cells in culture. Study of the mechanisms of growth and metastasis of tumors. Techniques for analyzing proliferation, migration and invasiveness of tumor cells. Cell counting. Techniques for measuring the activity of metalloproteases. Analysis of protein expression, kinase activation, protein association and subcellular protein localization by protein extraction, separation with SDS-page, co-immunoprecipitation, immunoblot techniques and immunofluorescence.
    Analysis of immune cell phenotypes by Continuous Flow Cytofluorometry. Indirect Immunofluorescence Microscopy on Hep-2 cells or on tissues from Liver, Kidney, Stomach etc.. Immunofixation techniques of electrophoresis or isofocusing on agarose ductile layer of proteins or immunoglobulins of serum and biological fluids.

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